蛋白活性實(shí)驗(yàn)-SCF活性蛋白

干細(xì)胞因子(SCF)，也稱(chēng)為肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(MGF)和鐵因子(SLF)，在造血、精子和黑色素生成中起著重要作用。SCF已被證明可以刺激TF-1細(xì)胞的增殖。

實(shí)驗(yàn)方法：測(cè)試這種效果,將TF-1細(xì)胞被接種在96 孔板上，密度1 x 10⁴細(xì)胞/孔，重復(fù)3孔。在不同濃度SCF中37°C孵育72 h，檢測(cè)不同濃度的SCF。在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)，細(xì)胞計(jì)數(shù)以細(xì)胞計(jì)數(shù)(CCK-8)測(cè)定細(xì)胞增殖。簡(jiǎn)要來(lái)說(shuō)，每孔添加10μl CCK-8，于37°C孵育1 - 4小時(shí)，然后在450 nm處測(cè)量吸光度。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：用倒置顯微鏡觀(guān)察添加SCF孵育72h后，TF-1細(xì)胞的細(xì)胞增殖情況如圖1所示。

    A                                      B

Figure 1. Cell proliferation of TF-1 cells after stimulated with SCF .

(A) TF-1 cells cultured in RPMI-1640, stimulated with 10ng/ml SCF for 72h;

(B) Unstimulated TF-1 cells cultured in RPMI-1640 for 72h.

SCF的劑量效應(yīng)曲線(xiàn)如圖2所示。很明顯，它顯著促進(jìn)了TF-1細(xì)胞的增殖，而ED50的效果通常是6.07到13.69ng/ml。

                                   Figure 2. The dose-effect curve of SCF on TF-1 cells