腎積水(hydronephrosis)是指尿液從腎盂排出受阻，蓄積后腎內(nèi)壓力增高，腎盂腎盞擴張，腎實質萎縮，導致腎功能減退。梗阻性腎病其主要的病理生理改變是腎積水、腎盂及腎小管壓力升高、腎間質水腫、炎性細胞浸潤、腎間質內(nèi)成纖維細胞增生、腎間質膠原蛋白聚集、腎間質增寬、腎小管萎縮，最終導致腎間質纖維化和腎單位減少，引起腎功能衰竭。

單側輸尿管梗阻是比較成熟的腎間質纖維化模型，結扎2周就可有成纖維細胞的增生和間質細胞外基質的生成。但是由于輸尿管的結扎使患側腎盂中的尿液不能外排，加上對側腎臟的代償作用，所以一般情況模型組血肌酐、尿素氮、NAG以及24h尿蛋白僅明顯高于正常組，但還處于正常范圍之內(nèi)，同時對側腎一般也無明顯改變，而患側腎臟組織中大量炎癥細胞浸潤、腎小管和間質的結構嚴重破壞以及腎間質纖維化，最后腎間質呈現(xiàn)廣泛的纖維化，而腎小球幾乎沒有病變。因此單側輸尿管梗阻模型在研究腎間質纖維化方面使研究的靶點明確，有利于其病變機理及抗間質纖維化治療的研究。

1.實驗動物

 SPF級Wistar大鼠，健康，雄性，體重為180g~200g

    2.實驗分組

    實驗分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組，每組15只動物。

3.實驗周期

7d，14d，21d，28d

4.建模方法

1術前一晚禁食,自由飲水。

2稱量大鼠，腹腔注射水合氯醛（15%）350mg/kg麻醉，剃毛固定后用碘酒及酒精擦拭手術區(qū)域。

3在上腹中線偏左約3-4mm剪開腹壁，手術組分離出左腎輸尿管。

4 在靠近腎下極處結扎并分離輸尿管，然后雙結扎，在2個結扎中間剪斷輸尿管，逐層縫合肌層及腹壁，酒精清潔縫合處。待小鼠清醒后，將其放回潔凈籠具后放回飼養(yǎng)室飼養(yǎng)，定期觀察大鼠狀態(tài)及死亡情況并做好記錄。

5置于加熱墊至其蘇醒。假手術組不結扎輸尿管，其余步驟相同。

6術后三天連續(xù)注射青霉素20萬單位/天防止感染。

  5模型的評價

5.1 蛋白尿含量、尿NAG活性測定  模型組術后2周、4周的24h尿蛋白含量以及尿酶NAG活性比正常組和假手術組明顯上升。

5.2 血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量測定  手術4周后，模型組血清Scr和BUN含量相對于正常組和假手術組有穩(wěn)定的升高。

5.3 形態(tài)學觀察：術后取左腎于4%多聚甲醛固定，依次脫水、透明、石蠟包埋、切片。做HE染色及Masson染色，光鏡觀察腎小球、腎小管-間質的病理變化及炎性細胞浸潤情況?？梢娔Ｐ徒M小鼠的腎間質出現(xiàn)炎癥細胞浸潤，腎小管上皮細胞萎縮、刷狀緣消失、腎小管管腔擴張呈囊狀，管腔塌陷，間質明顯增寬，間質內(nèi)可見大量炎性細胞浸潤，伴有較多的成纖維細胞增生。并隨時間的延長炎癥細胞浸潤加重，小管上皮細胞扁平、脫落，腎小管萎縮、擴張加重，甚至塌陷、消失，膠原纖維增生，間質纖維化加重 。

6  注意事項

1 分離輸尿管時注意不要損傷腎臟

2 注意清理傷口，防止感染。

3.取下腎臟后要剝離腎表面的結締組織薄膜。

圖1 腎臟大體圖（左邊為未結扎側腎，右邊為輸尿管結扎側腎，腎盂積水，腎臟體積明顯擴大，皮質變?。?/p>