實時熒光定量PCR實驗服務(wù)
使用說明書
僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!
第1版（2016年04月修訂）
關(guān)聯(lián)信息
實時熒光定量PCR的原理是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針對PCR產(chǎn)物進行標(biāo)記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應(yīng)過程，結(jié)合相應(yīng)的軟件對產(chǎn)物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。
實時熒光定量PCR以其得到結(jié)果快、靈敏度高、重復(fù)性好等優(yōu)點廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究中，如基因表達分析、MicroRNA 與非編碼 RNA 分析、SNP 基因分型分析、拷貝數(shù)變異 （CNV）分析等。
實驗流程
1.提取RNA
2.cDNA合成
3.引物設(shè)計
4.PCR預(yù)試驗
5.定量PCR
6.結(jié)果分析
實驗儀器
Roche羅氏LightCycler? 480實時熒光定量PCR系統(tǒng)
服務(wù)內(nèi)容
1.客戶提供基因定量PCR引物或引物序列；
2.客戶提供cDNA或DNA；
3.預(yù)實驗，PCR檢測引物的特異性和擴增效率；
4.正式實驗，實時熒光定量PCR檢測；
5.ΔΔCT法分析并處理結(jié)果，提供實驗報告。
實驗類型和周期
項目 | 樣品數(shù) | 周期 |
SYBR Green I染料法 | 檢測樣品數(shù)＜10 | 2~3個工作日 |
10≤檢測樣品數(shù)≤20 | 3~5個工作日 | |
檢測樣品數(shù)＞20 | 4~7個工作日 | |
探針法 | 檢測樣品數(shù)＜10 | 1~3周 |
10≤檢測樣品數(shù)≤20 | ||
檢測樣品數(shù)＞20 |
備注：
1.所有的實驗項目需遵守相關(guān)法律條款；
2.所有樣本都必須不具有傳染性。
